Виды цитологических мазков: классификация и назначение 

Виды цитологических мазков: классификация и назначение в современной лабораторной диагностике

Цитологическое исследование остается «золотым стандартом» ранней диагностики онкологических и предраковых заболеваний. Точность диагноза напрямую зависит от качества полученного материала, правильности его фиксации и выбора метода окрашивания. В нашей практике мы регулярно сталкиваемся с ситуациями, когда ложноотрицательный результат был следствием не ошибки врача-цитолога, а неверно выбранного типа мазка или нарушения протокола забора биоматериала. Понимание того, какие существуют виды цитологических мазков: классификация и назначение, критически важно для клиницистов, лаборантов и руководителей диагностических центров.

Эта статья не является теоретическим обзором из учебника. Это практическое руководство, основанное на опыте интеграции передовых технологий в лабораторную диагностику. Мы разберем технические нюансы приготовления препаратов, сравним эффективность ручных и автоматизированных методов, а также дадим рекомендации по выбору расходных материалов, соответствующих международным стандартам качества.

Опираясь на более чем 20-летний опыт компании ООО «Хубэй Тайкан Медицинское Оборудование» — национального высокотехнологичного предприятия, специализирующегося на комплексном обновлении патологических лабораторий, — мы рассмотрим, как современные решения в области цитопатологии влияют на точность диагностики. Компания, объединяющая научные исследования, производство и сервис, обеспечивает продуктами свыше 2800 медицинских учреждений, что позволяет нам говорить о тенденциях, подтвержденных реальной клинической практикой.

Базовая классификация: от стекла к цифровой патологии

Традиционно цитологические препараты делят на две большие группы: конвенциональные (ручные) мазки и жидкостную цитологию (Liquid-Based Cytology, LBC). Однако внутри этих групп существует множество подвидов, определяемых методом фиксации, типом окрашивания и целью исследования. Ошибка в выборе типа препарата может привести к артефактам, маскирующим патологические клетки, или к полной непригодности образца для анализа.

Мы наблюдаем устойчивый тренд перехода крупных лабораторных сетей на системы жидкостной цитологии. По нашим данным, внедрение LBC снижает процент неудовлетворительных образцов с 15-20% до 2-3%. Тем не менее, конвенциональные мазки сохраняют свою актуальность в условиях ограниченного бюджета или при работе с нестандартными биоматериалами, где методы консервации клеток в жидкости еще не отработаны.

Конвенциональные мазки: традиционные методы и их ограничения

Конвенциональная цитология — это метод, при котором материал непосредственно наносится на предметное стекло и фиксируется. Несмотря на развитие технологий, этот метод занимает значительную долю рынка благодаря низкой стоимости расходных материалов и простоте исполнения. Однако он требует высокой квалификации медицинского персонала на этапе забора материала.

Прямой мазок-отпечаток

Самый простой вид препарата. Материал (слизь, мокрота, содержимое кист) наносится на стекло шпателем или пипеткой, затем распределяется другим стеклом или петлей. Этот метод часто используется при экстренной интраоперационной диагностике.

Преимущества: скорость получения результата (до 15-20 минут при использовании быстрой фиксации), минимальные затраты.

Недостатки: неравномерное распределение клеток, наличие толстых слоев, перекрывающих друг друга, большое количество слизи и крови, затрудняющих визуализацию. В нашей практике были случаи, когда из-за слишком толстого слоя клеток в прямом мазке пропускали микроинвазивный рак шейки матки, так как атипичные клетки оказались «спрятаны» под слоем эритроцитов.

Мазок-соскоб (для гинекологии)

Классический метод забора материала с экзо- и эндоцервикса с помощью шпателя Айре или щетки. Материал распределяется на одном или двух стеклах. Ключевой момент здесь — немедленная фиксация. Если стекло высыхает на воздухе более 2-3 секунд до погружения в фиксатор, морфология клеток необратимо меняется: ядра сморщиваются, цитоплазма вакуолизируется.

Для обеспечения стабильного качества таких мазков необходимо строгое соблюдение протокола фиксации. Мы рекомендуем использовать спиртовые фиксаторы высокого качества или специальные коммерческие спреи-фиксаторы. Использование дешевого технического спирта недопустимо, так как примеси вызывают преципитацию белков и создают фон, имитирующий воспаление.

Мазки из негинекологических источников

Сюда относятся мазки из мокроты, плевральной жидкости, мочи, соскобы с кожи и слизистых оболочек полости рта. Особенность этих материалов — гетерогенность. Например, в мокроте целевые клетки (альвеолярные макрофаги или опухолевые клетки) могут составлять менее 1% от общего объема материала.

Для повышения диагностической ценности таких мазков часто применяют метод обогащения: центрифугирование с последующим нанесением осадка на стекло. Без этого этапа чувствительность метода падает катастрофически. Один из наших клиентов, региональный диспансер, столкнулся с низким выявлением рака легких именно из-за отказа от этапа центрифугирования мокроты. После внедрения простых лабораторных центрифуг и стандартизации протокола нанесения осадка диагностическая yield увеличилась на 40%.

Жидкостная цитология (LBC): технологический прорыв

Жидкостная цитология решает главные проблемы конвенциональных мазков: неравномерность распределения клеток и наличие артефактов. Принцип метода заключается в том, что материал помещается не на стекло, а в специальную стабилизирующую жидкость, которая сохраняет клетки intact (неповрежденными) и позволяет удалить кровь, слизь и воспалительные элементы перед нанесением на стекло.

Тонкослойная цитология (ThinPrep и аналоги)

Это наиболее распространенный вид LBC. Процесс включает несколько этапов: диспергирование образца в растворе, фильтрация через мембрану с определенным размером пор и перенос отфильтрованных клеток на стекло в виде тонкого монослоя диаметром около 2 см.

Ключевые преимущества:

• Монослой клеток: клетки не накладываются друг на друга, что облегчает идентификацию ядерных аномалий.
• Чистый фон: отсутствие эритроцитов и слизи улучшает контрастность окрашивания.
• Стандартизация: площадь просмотра стандартизирована, что позволяет использовать алгоритмы полуавтоматического скрининга.

Однако у метода есть и ограничения. Фильтрация может приводить к потере части клеточного материала, особенно если образец бедноклеточный. Кроме того, клетки в тонкослойных препаратах могут выглядеть немного иначе, чем в конвенциональных мазках: они меньше, плотнее, с более четкими границами. Цитологам требуется период переобучения (обычно 2-3 месяца активной практики) для адаптации к новой морфологии.

Современные системы, такие как разрабатываемые и поставляемые ООО «Хубэй Тайкан», включают в себя не только оборудование для приготовления препаратов (цитосепарационные препараторы-окрасчики, жидкостные тонкослойные прессы), но и интегрированные решения для контроля качества на каждом этапе. Это позволяет минимизировать риски потери материала и обеспечить воспроизводимость результатов, что особенно важно при массовом скрининге.

Метод осаждения (Sedimentation-based LBC)

Альтернативный подход, используемый в некоторых системах. Здесь материал не фильтруется, а очищается за счет градиентной плотности и центрифугирования. Клетки оседают на дне пробирки, а затем автоматически переносятся на стекло.

Этот метод лучше сохраняет трехмерные структуры клеточных групп, что важно для диагностики железистых поражений. В нашей оценке, для лабораторий, работающих с большим потоком гинекологических материалов, выбор между тонкослойным методом и методом осаждения должен базироваться на стоимости расходных материалов и совместимости с имеющимся оборудованием для окрашивания. Технически оба метода обеспечивают сопоставимую чувствительность и специфичность при выявлении HSIL (высокоградусных интраэпителиальных поражений).

Методы фиксации и окрашивания: химия процесса

Выбор вида мазка неразрывно связан с методом его фиксации и окрашивания. Неправильная комбинация приводит к тому, что даже идеально взятый материал становится нечитаемым.

Фиксация: спирт vs аэрозоль

Фиксация должна происходить мгновенно. Цель — денатурировать белки и остановить ферментативную автолизацию клеток.

• Спиртовая фиксация (95-96% этанол или метанол): золотой стандарт. Обеспечивает наилучшее сохранение ядерных деталей. Требует наличия емкостей с фиксатором и соблюдения сроков замены раствора (не реже 1 раза в неделю или после 50 стекол).
• Аэрозольные фиксаторы: удобны для выездных осмотров. Однако они часто содержат полиэтиленгликоль, который создает липкую пленку. Если распылять фиксатор с расстояния более 20-30 см, капли успевают высохнуть в воздухе, и на стекле образуется «снег» из кристаллов, мешающий диагностике. Мы категорически не рекомендуем аэрозоли для рутинной работы в стационарной лаборатории из-за нестабильности качества.

Окрашивание по Романовскому-Гимзе vs Папаниколау

Выбор красителя определяет, какие детали будут видны.

Окрашивание по Папаниколау (Papanicolaou stain): основной метод для гинекологической цитологии. Оно обеспечивает полихромное окрашивание: ядра темно-синие/черные, цитоплазма плоских клеток розовая/оранжевая, цилиндрических — голубая/зеленая. Это позволяет четко видеть степень ороговения клеток и ядерные аномалии. Для негинекологических материалов оно также применимо, но менее информативно для оценки воспаления.

Окрашивание по Романовскому-Гимзе (May-Grünwald-Giemsa): чаще используется для гематологии и негинекологической цитологии (пунктаты щитовидной железы, лимфоузлы). Оно лучше дифференцирует типы лейкоцитов и выявляет микроорганизмы (бактерии, грибы). Однако оно хуже показывает детали ядра эпителиальных клеток по сравнению с методом Папаниколау.

Важно: нельзя использовать один и тот же набор красителей для обоих методов без тщательной промывки оборудования. Перекрестное загрязнение красителями приводит к искажению цветовой палитры и диагностическим ошибкам. Компания «Хубэй Тайкан» предлагает полный спектр экологически безопасных реагентов, включая растворы по Гимзе и Гематоксилину-Эозину, прошедшие многоуровневый контроль качества, что исключает вариативность окрашивания от партии к партии.

Специализированные виды мазков и дополнительные исследования

Современная цитология не ограничивается только морфологией. Полученный материал часто используется для молекулярно-генетических тестов, иммуноцитохимии и вирусологических исследований. Это накладывает дополнительные требования к виду мазка и способу хранения материала.

Иммуноцитохимия (ИЦХ)

ИЦХ позволяет выявлять специфические антигены в клетках (например, рецепторы гормонов, маркеры происхождения опухоли). Для ИЦХ критически важна правильная фиксация. Формалиновая фиксация, стандартная для гистологии, часто разрушает антигенные детерминанты, пригодные для цитологии. Поэтому для ИЦХ предпочтительны спиртовые фиксаторы или специальные фиксаторы на основе ацетона.

Мы рекомендуем планировать забор материала так, чтобы часть образца была нанесена на специальные адгезивные стекла (silanized slides), которые предотвращают отслаивание клеток при агрессивных процедурах иммуноокрашивания. Обычные стекла приводят к потере до 30% клеточного материала во время промывок, что делает интерпретацию невозможной.

Молекулярная диагностика (ВПЧ, мутации)

Тестирование на вирус папилломы человека (ВПЧ) высокого риска стало частью первичного скрининга во многих странах. Для ПЦР-диагностики качество ДНК важнее, чем морфология клеток. Жидкостная цитология здесь имеет огромное преимущество: остаток суспензии после приготовления мазка можно использовать для выделения ДНК.

При использовании конвенциональных мазков для молекулярных тестов требуется соскабливание материала со стекла, что повышает риск контаминации и снижает выход ДНК. Если лаборатория планирует предлагать комплексные услуги «цитология + ВПЧ-тест», переход на LBC экономически оправдан уже при потоке от 500 пациентов в месяц. В портфеле «Хубэй Тайкан» представлены одноразовые пробирки для сбора вирусных проб и образцов, специально разработанные для сохранения целостности ДНК/РНК, что делает их идеальным выбором для комбинированных диагностических протоколов.

Сравнительный анализ: какую технологию выбрать?

Выбор между конвенциональной цитологией и LBC зависит от бюджета, нагрузки лаборатории и требуемой точности. Ниже приведена сравнительная таблица, основанная на нашем опыте внедрения этих систем.

Из таблицы видно, что LBC выигрывает по качеству и функциональности, но проигрывает в цене. Для частных лабораторий, ориентированных на премиум-сегмент и онкодиагностику, LBC является безальтернативным выбором. Для государственных учреждений с ограниченным финансированием оптимизация протоколов конвенциональной цитологии (обучение персонала, контроль фиксации) может дать лучший результат, чем покупка дорогого оборудования без должной подготовки кадров.

Типичные ошибки и как их избежать

Даже при использовании лучшего оборудования человеческий фактор остается главным источником ошибок. Мы выделили три самые частые проблемы, с которыми сталкиваются наши клиенты.

1. Высушивание артефактов

Это самая распространенная причина брака. Если стекло с мазком лежит на воздухе более 5-10 секунд перед фиксацией, клетки деградируют. Ядра становятся пикнотичными, цитоплазма сморщивается. Решение: фиксатор должен находиться в непосредственной близости от места забора материала. Лаборант должен погружать стекло в спирт немедленно после нанесения мазка.

2. Чрезмерно толстый слой материала

Стремление взять «побольше» материала играет злую шутку. В толстом слое краситель не проникает вглубь, клетки обесцвечиваются или окрашиваются неравномерно. Решение: обучать медицинский персонал технике «тонкого мазка». Для гинекологии достаточно одного оборота щетки, равномерно распределенного по стеклу.

3. Неправильная маркировка

Кажется банальным, но потеря идентичности образца — это юридическая катастрофа. Стирание надписей спиртом, использование нестойких маркеров. Решение: использовать алмазные карандаши для маркировки матового края стекла или печатать этикетки, устойчивые к ксилолу и спирту. Никогда не полагайтесь на рукописные надписи поверх мазка.

Контроль качества и нормативные требования

Лаборатория обязана соблюдать внутренние и внешние стандарты качества. Деятельность регламентируется международными стандартами, такими как ISO 15189 «Медицинские лаборатории. Требования к качеству и компетентности», а также национальными клиническими рекомендациями.

Внутренний контроль качества должен включать:

• Ежедневную проверку качества окраски (контрольные стекла).
• Слепой пересмотр 10% отрицательных случаев старшим цитологом.
• Регистрацию процента неудовлетворительных образцов (benchmark: не более 5% для LBC и 10-15% для конвенциональных мазков).

Участие в системах внешней оценки качества (ВОК/FSQAS) обязательно для подтверждения компетентности лаборатории. Отсутствие сертификата ВОК может стать основанием для непринятия результатов вашей лаборатории страховыми компаниями или другими медицинскими учреждениями.

Заключение: стратегия выбора для вашей лаборатории

Разбирая виды цитологических мазков: классификация и назначение, мы видим, что универсального решения не существует. Конвенциональные мазки остаются рабочим инструментом для массовой скрининговой программы в условиях жесткой экономии, но их потенциал ограничен человеческим фактором. Жидкостная цитология — это инвестиция в будущее, обеспечивающая стандартизацию, возможность молекулярных тестов и интеграцию с системами искусственного интеллекта для скрининга.

Если вы стоите перед выбором модернизации цитологического отделения, начните с аудита текущего потока пациентов и структуры заболеваемости. Для онкодиагностических центров переход на LBC окупается за счет снижения количества повторных заборов и повышения доверия врачей-клиницистов к вашим результатам. Для небольших лабораторий ключевым фактором успеха станет не столько тип мазка, сколько строгий контроль преаналитического этапа: обучения медсестер и врачей заборщикам.

Помните: самый дорогой микроскоп не исправит плохо приготовленный мазок. Качество диагностики начинается с первого касания шпателя к слизистой.

Компания ООО «Хубэй Тайкан Медицинское Оборудование», обладая собственной производственной базой площадью 20 000 квадратных метров и инвестируя более 12% выручки в НИОКР, предлагает комплексный подход к оснащению лабораторий. От экологичных реагентов и автоматизированных тканевых процессоров до систем AI-интеллектуального обнаружения FCD — мы предоставляем решения, которые помогают лабораториям соответствовать самым строгим стандартам диагностики. Наши партнёрства с ведущими университетами и участие в разработке отраслевых стандартов гарантируют, что вы получаете технологии завтрашнего дня уже сегодня.

Для получения консультации по подбору оборудования для жидкостной цитологии, закупке реагентов или организации контроля качества в вашей лаборатории, свяжитесь с нашими экспертами. Мы поможем подобрать решение, соответствующее вашему бюджету и задачам.

Оборудование для цитологических исследований

Часто задаваемые вопросы

В чем главное отличие мазка по Папаниколау от мазка по Лейшману?

Мазок по Папаниколау предназначен преимущественно для выявления дисплазий и рака шейки матки, так как он лучше окрашивает кератин и ядерные структуры эпителиальных клеток. Мазок по Лейшману (вариант Романовского-Гимзы) лучше подходит для диагностики воспалительных процессов, инфекций и гематологических патологий, так как дает четкую дифференцировку лейкоцитов и бактерий. Выбор зависит от цели исследования: онкоскрининг или поиск инфекции.

Можно ли использовать один и тот же образец для цитологии и ВПЧ-теста?

Да, но только при использовании метода жидкостной цитологии (LBC). В этом случае материал собирается в специальную пробирку со стабилизирующей жидкостью. Часть суспензии идет на приготовление мазка, а остаток используется для выделения ДНК и ПЦР-диагностики. При конвенциональном мазке материал фиксируется на стекле, и выделение качественной ДНК для ПЦР затруднено или невозможно без специальных процедур соскабливания, которые снижают эффективность.

Как долго можно хранить неокрашенные мазки перед окрашиванием?

Зафиксированные в 96% спирте мазки могут храниться длительное время (месяцы и даже годы) без потери морфологических качеств, если спирт регулярно обновляется и емкость герметична. Однако не рекомендуется хранить мазки более 2-3 недель перед окрашиванием, так как возможно постепенное вымывание некоторых клеточных компонентов. Нефиксированные мазки должны быть окрашены немедленно; хранение сухих нефиксированных мазков недопустимо, так как это приводит к необратимой деградации клеток.

Почему в заключении пишут «ASC-US» или «LSIL»? Что это значит?

Это термины системы Bethesda, международной стандартной классификации цитологических отчетов. ASC-US (Atypical Squamous Cells of Undetermined Significance) означает атипичные плоские клетки неясного значения — это пограничное состояние, требующее дополнительного обследования (часто теста на ВПЧ). LSIL (Low-grade Squamous Intraepithelial Lesion) — плоскоклеточное интраэпителиальное поражение низкой степени, что обычно соответствует легкой дисплазии (CIN 1) и часто ассоциировано с ВПЧ-инфекцией. Эти термины унифицируют понимание диагноза между цитологом и лечащим врачом.

Требуется ли специальная подготовка пациента к взятию цитологического мазка?

Да, для гинекологических мазков рекомендуется воздержаться от половых контактов, использования вагинальных свечей, спринцеваний и тампонов в течение 48 часов до исследования. Также не следует проводить забор материала во время менструации. Оптимальное время — середина менструального цикла. Для мазков из полости рта и горла — не чистить зубы и не полоскать рот антисептиками утром перед анализом. Соблюдение этих правил минимизирует риск получения неудовлетворительного образца.